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        關于小鼠ELISA試劑盒的操作方法或許你了解的還不夠多

        發布時間:2021-09-26      點擊次數:457

            小鼠ELISA試劑盒--小鼠信號轉導子和轉錄激活子1(STAT1)ELISA試劑盒是經我司專業的技術人員檢定并得到國內各大高校實驗團隊,課題組認可的科研用ELISA試劑盒,該產品靈敏度高,特意性強,檢測測定樣本的結果穩定準確,做科研實驗找我們就對了。

            小鼠ELISA試劑盒的操作方法:

            雙抗體夾心法:

            1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。

            2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。

            3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。

            4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。

            5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

            6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

            間接法:

            1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;

            2.次日洗滌3次;

            3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;

            4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;

            5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;

            6.’最后一遍用DDW洗滌。

            其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
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